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一、病原學(xué)研究及成果

1.布魯氏菌菌型分布研究

1953～2005年全區(qū)對(duì)分離出的2 126株布魯氏菌進(jìn)行了菌型鑒定，其中羊種菌1 604株，牛種菌445株，豬種菌15株，犬種菌1株，非典型菌4株，粗糙型菌2株，未定種55株。生物學(xué)分型有羊種1型、2型、3型，牛種1型、3型、6型、9型，豬種1型，共4個(gè)種9個(gè)生物型。

通過毒力試驗(yàn)對(duì)各菌型進(jìn)行了毒力測(cè)定。毒力試驗(yàn)證明，未變異的羊種菌絕大部分是強(qiáng)毒菌，個(gè)別地區(qū)（如哲盟科左中旗敖本臺(tái)公社）也檢出了弱毒菌。已變異的羊種菌大部分是弱毒菌，也有少數(shù)強(qiáng)毒菌，變異菌呈強(qiáng)毒較為少見。牛種未變異菌多為弱毒，強(qiáng)毒菌多是牛3型。

2.布魯氏菌生長(zhǎng)特性的觀察研究

通過觀察研究發(fā)現(xiàn)，3種菌在pH值為6.6～7.2的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好，在培養(yǎng)基加入羊血紅蛋白溶液時(shí)，布魯氏菌培養(yǎng)陽(yáng)性率比常用的Castanede法提高28.9%，出菌時(shí)間平均縮短2～3天。

通過布魯氏菌對(duì)數(shù)生長(zhǎng)曲線研究試驗(yàn)證明，3種菌在37℃環(huán)境下培養(yǎng)，遲滯期為2～3小時(shí)，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為3～38小時(shí)，繁殖高峰在30～38小時(shí)，平衡期為38～120小時(shí)，死亡期超過一個(gè)月，計(jì)算每分裂一次時(shí)間為132～227分鐘左右。得出的研究結(jié)論是:布魯氏菌生長(zhǎng)速度比一般細(xì)菌慢得多，4～5天才能長(zhǎng)出單個(gè)菌落。

此外，在病原學(xué)研究中研究人員還進(jìn)行了布魯氏菌生存力及消毒試驗(yàn)，病羊排菌期試驗(yàn)和布氏菌噬菌體的分離等觀察與研究，取得并積累了豐富的科學(xué)數(shù)據(jù)及資料。1978年全區(qū)在哲里木盟科左中旗敖本臺(tái)鄉(xiāng)檢菌查源，一次由正產(chǎn)胎盤、流產(chǎn)材料中分離出羊、牛、豬、非典型布魯氏菌142株，這在國(guó)際上也是十分罕見的。

二、菌苗免疫研究及成果

1.豬型2號(hào)菌苗的研制與應(yīng)用

為了尋找能夠適用于多種家畜免疫使用的菌苗，20世紀(jì)60年代初期，自治區(qū)布魯氏菌病防治研究所用農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)生物藥品監(jiān)察所（現(xiàn)中國(guó)獸藥監(jiān)察所）已經(jīng)選育成功的豬型2號(hào)菌苗，對(duì)內(nèi)蒙古的土種山羊進(jìn)行了菌苗注射，發(fā)現(xiàn)其對(duì)山羊的保護(hù)率達(dá)82%，比19號(hào)菌苗高，對(duì)牛和綿羊的保護(hù)率不低于19號(hào)菌苗。

豬型2號(hào)菌苗注射方法不適宜內(nèi)蒙古地區(qū)大面積推廣應(yīng)用。從1967年開始，內(nèi)蒙古布魯氏菌病防治研究所、內(nèi)蒙古獸醫(yī)站與中國(guó)獸藥監(jiān)察所協(xié)作，經(jīng)過4年不懈的工作，試驗(yàn)成功了口服免疫法。實(shí)驗(yàn)證明，該法的免疫保護(hù)率綿羊?yàn)?SPAN lang=EN-US>82.7%，山羊?yàn)?SPAN lang=EN-US>78.8%，牛為71.4%，豬為70.9%，用于懷孕母畜也安全有效。1971年錫林郭勒盟正白旗用7天的時(shí)間完成了全旗416 004頭（只）畜間豬型2號(hào)菌苗口服免疫任務(wù)；烏蘭察布盟化德縣在3天內(nèi)就完成了全縣167 614頭（只）牲畜的畜間口服免疫任務(wù)，免疫密度達(dá)到了99.3%。從推行這種口服免免疫法至1981年，全區(qū)共免疫成年羊1.5億只次。

1973～1975年，研究人員通過在觀察地區(qū)收集胎羔、胎盤等材料，對(duì)口服免疫法預(yù)防效果進(jìn)行了檢測(cè)評(píng)估。通過對(duì)收集的29 258份胎羔、胎盤等材料進(jìn)行布氏菌檢查，1973年、1974年分別只檢出5株和3株羊種布魯氏菌，1975年一株布魯氏菌也未分離出來，證明現(xiàn)場(chǎng)使用預(yù)防效果是有效的。

為了進(jìn)一步改進(jìn)豬型2號(hào)菌苗的免疫程序，1978年以后，通過進(jìn)行羔羊、犢牛免疫期試驗(yàn)，為5～6個(gè)月齡的羔羊一次口服100億菌體的豬型2號(hào)菌苗，使其在懷孕1～4胎時(shí)對(duì)強(qiáng)毒菌攻擊的保護(hù)率分別達(dá)到了93%、80%、73%和66%，實(shí)現(xiàn)了羔羊只要服苗一次即可達(dá)到終身免疫(一般羊飼養(yǎng)5～6年即淘汰)。

研究人員還給6～11個(gè)月齡的犢牛一次口服500億菌體的豬型2號(hào)菌苗，實(shí)施強(qiáng)毒菌攻擊，在對(duì)照組全部流產(chǎn)的情況下，服苗牛的保護(hù)力第1胎為5/7，第2胎為4/5，第3胎為3/5，證明抗布魯氏菌性流產(chǎn)的效果是明顯的。自1982年推廣對(duì)羔羊、犢牛實(shí)行一次免疫后，為保證幼畜免疫用苗，全區(qū)每年下發(fā)1500萬(wàn)頭（只）份菌苗，提高了預(yù)防效果。

2.S₁₀₅菌苗菌株的選育

為尋找更加安全有效的免疫菌苗，內(nèi)蒙古地方病防治研究所與北京生物制品研究所合作，應(yīng)用硫酸二乙酯（DES）化學(xué)劑處理豬型2號(hào)菌苗菌株，減毒誘變育種，選育出了S₁₀₅菌株，經(jīng)用小白鼠、豚鼠、羊和豬做試驗(yàn)，證明該菌株的毒力較豬型2號(hào)菌苗菌株低，而且穩(wěn)定性、免疫源性不低于豬型2號(hào)菌苗，給孕羊注射不會(huì)引起流產(chǎn)，安全有效。

3.M₁₁₁菌苗菌株的選育

為區(qū)別人工免疫與自然感染的畜群，內(nèi)蒙古地方病防治研究所與內(nèi)蒙古獸醫(yī)工作站聯(lián)合研究培育出無(wú)凝集源性菌苗M₁₁₁，它是由布氏菌粗糙型菌中選出的菌株，經(jīng)過誘變減毒，免疫后不產(chǎn)生光滑型（S）抗體（自然界中布氏菌大都是光滑型菌，產(chǎn)生光滑型抗體），已進(jìn)行了安全試驗(yàn)、劑量試驗(yàn)、大面積的免疫應(yīng)用試驗(yàn)。

4.提取特異性布魯氏菌免疫核糖核酸（IRNA）

內(nèi)蒙古地方病防治研究所于1979年成功地提取出特異性布魯氏菌的免疫核糖核酸（IRNA），并通過動(dòng)物試驗(yàn)證明提取出的免疫核糖核酸（IRNA）確實(shí)具有活性和免疫信息，治療慢性布魯氏菌病有一定效果。

三、實(shí)驗(yàn)診斷新技術(shù)試驗(yàn)研究

1979年內(nèi)蒙古地方病防治研究所成功地提取了辣根過氧化物酶，并用其分別對(duì)256例臨床已經(jīng)確診的布魯氏菌病患者和170名疑似布魯氏菌病患者進(jìn)行了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢查，結(jié)果陽(yáng)性率分別為93%和61.2%，說明應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢查布魯氏菌病有較高的特異性和敏感性。

內(nèi)蒙古地方病防治研究所還應(yīng)用葡萄球菌A蛋白（SPA)代替抗人球蛋白做抗體檢查試驗(yàn)，在為587名布魯氏菌病患者應(yīng)用葡萄球菌A蛋白（SPA）做抗體檢查后發(fā)現(xiàn)，兩種方法總符合率基本一致，說明葡萄球菌A蛋白（SPA）完全可以代替抗人球蛋白做抗體檢查。而葡萄球菌A蛋白（SPA）制備方法簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，使用方便，易于推廣，并能縮短檢查所需的時(shí)間。

四、發(fā)病機(jī)理研究及成果

多年來，全區(qū)的地方病防治和科研人員應(yīng)用細(xì)菌學(xué)、血清學(xué)，免疫學(xué)等方法，對(duì)布魯氏菌病的發(fā)病機(jī)理進(jìn)行了深入的探討和研究。

1.體液免疫在發(fā)病機(jī)理中的作用

研究結(jié)果顯示，急性期和慢性期布魯氏菌病患者總補(bǔ)體（CH₅₀）的含量和補(bǔ)體3（C₃）的含量較正常人低，血清溶菌酶含量變化曲線與檢出菌結(jié)果一致。這說明，機(jī)體帶菌時(shí)血清溶菌酶活性升高，疾病處于恢復(fù)階段時(shí)溶菌酶下降。也就是說，溶菌酶的變化，從某種意義上講，是機(jī)體疾病狀態(tài)及變化的一種反映。

通過測(cè)定免疫球蛋白的水平，發(fā)現(xiàn)特異性抗布氏菌IgG、IgM、和IgA都具有凝集活性，其中IgM型抗體首先出現(xiàn)，接著出現(xiàn)的是IgM型抗體，IgG型抗體出現(xiàn)較晚，它和血清總凝集活性下降相一致。

通過觀察血清殺菌力，證實(shí)了實(shí)驗(yàn)性豚鼠布魯氏菌病陽(yáng)性血清有明顯的抑菌作用。

2.細(xì)胞免疫在發(fā)病機(jī)理中的地位

以下試驗(yàn)研究顯示：細(xì)胞免疫在布魯氏病發(fā)病過程中起著重要的作用。

通過觀察研究發(fā)現(xiàn)，急慢性期布魯氏菌病患者，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率較正常人低，E玫瑰花形成率基本上在正常范圍，致敏的淋巴細(xì)胞和特異性轉(zhuǎn)移因子可成功地轉(zhuǎn)移給陰性受體，致敏的淋巴細(xì)胞在特異抗原刺激下可釋放移動(dòng)抑制因子和有絲分裂因子。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和布魯氏菌病患者免疫機(jī)體狀態(tài)研究顯示，布魯氏菌病患者淋巴細(xì)胞的數(shù)量雖無(wú)明顯變化，但其功能顯著降低。

為了深入研究淋巴細(xì)胞亞群的變化規(guī)律和特點(diǎn)，研究人員用刀豆蛋白A（ConA）和花豆血凝素（PHA）激活T細(xì)胞位點(diǎn)不同的原理，測(cè)定了慢性期布魯氏菌病患者T細(xì)胞的亞群，證實(shí)抑制型和輔助型T細(xì)胞功能呈等比例降低。

五、病理學(xué)研究及成果

20世紀(jì)50年代后期，內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院對(duì)死于布魯氏菌性心臟病和布魯氏菌性神經(jīng)系統(tǒng)病患者尸體進(jìn)行了解剖，證實(shí)布魯氏菌病患者可發(fā)生潰瘍性疣贅性心內(nèi)膜炎、心肌炎，心包炎，血管炎，腦脊髓膜炎和腦脊髓實(shí)質(zhì)性改變。

20世紀(jì)70年代以后，內(nèi)蒙古地方病防治研究所、內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院等單位先后進(jìn)行了布魯氏菌強(qiáng)毒菌和菌苗菌株感染豚鼠的病理形態(tài)動(dòng)態(tài)觀察，豬型2號(hào)菌苗免疫牛、羊和實(shí)驗(yàn)對(duì)照動(dòng)物的病理改變比較，并應(yīng)用過氧化物酶標(biāo)記抗體，對(duì)豬型2號(hào)菌苗免疫羔羊組織內(nèi)免疫球蛋白的定位及形態(tài)學(xué)觀察，以及家兔感染牛、羊、豬種布氏菌后病理改變等項(xiàng)工作，證實(shí)了強(qiáng)毒菌株和菌苗菌均能引起本質(zhì)上相同的病理變化，但在病變程度上有差異。豚鼠的病變是經(jīng)過變質(zhì)、滲出、增生和硬化這樣一個(gè)過程而告終，這與臨床經(jīng)過一致；豬型2號(hào)菌苗免疫牛羊，機(jī)體可產(chǎn)生良好的組織學(xué)反應(yīng)，不引起嚴(yán)重的病理?yè)p傷，所產(chǎn)生的抗體主要是IgG型；三種菌對(duì)家兔所致病理?yè)p傷以豬種菌最為明顯，并多有嚴(yán)重的壞死和化膿。

1978～2005年，全區(qū)布魯氏菌病防治工作者圍繞布魯氏菌病防控所進(jìn)行的科學(xué)研究或?qū)嶒?yàn)調(diào)查，共計(jì)有16項(xiàng)獲省部級(jí)以上表彰獎(jiǎng)勵(lì)或科技進(jìn)步成果獎(jiǎng)。